MITA介导的细胞抗病毒反应***转导及其调节机制 钟波 著 mobi 下载 网盘 caj lrf pdf txt 阿里云

本书利用表达隆的方法，发现了一个参与病毒感染诱导i型干扰素表达的蛋白，命名为mita，以mita为诱饵蛋白进行了酵母双杂交实验，筛选得到一个与mita相互作用的泛素连接酶rnf5。本论文的研究成果不仅深化了研究者对细胞抗病毒反应机理的认识，也为未来治疗病毒感染引发的相关疾病提供了分子靶标。

第一章 研究背景

第一节 抗病毒天然免疫概述

一、天然免疫简介

二、抗病毒天然免疫反应***转导概述

三、I型干扰素转录激活机制

第二节 PRRs及其介导的天然抗病毒免疫反应***转导

一、识别病毒的模式识别受体及其对病毒的识别

二、PRRs协同作用介导细胞抗病毒反应

三、PRRs介导的细胞抗病毒反应***转导

第三节 PRRs介导的***转导的调节机制

一、阻断介导***转导的分子间的相互作用

二、降解介导***转导的蛋白

三、调节***分子的去泛素化

四、其他

第二章 实验材料与实验方法

第一节 实验材料

一、荧光素酶报告基因实验相关材料

二、细胞、细胞因子与细胞培养

三、载体构建所需材料

四、酵母双杂交所需材料

五、免疫共沉淀以及Western blot实验相关材料

第二节 实验方法

一、质粒构建、DNA纯化、磷酸钙沉淀转梁293细胞、免疫共沉淀、Westem blot与RNA blot

二、荧光素酶报告基因实验

三、表达***筛选

四、酵母双杂交实验

五、亚细胞器分离实验

六、RT―PCR实验

七、VSV空斑实验

八、泛素化实验

九、LC―MS／MS鉴定MITA磷酸化位点

十、免疫荧光与激光共聚焦显微镜观察

十一、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

十二、原代细胞的培养与转染

十三、32P in vivo标记细胞与放射自显影实验

十四、体外泛素化实验

第三章 实验结果与讨论

第一节 MITA介导的***转导机制

一、研究背景与立项依据概述

二、MITA的鉴定与表达分析

三、过表达MITA能有效激活IRF3

四、RNAi下调MITA的表达抑制seV诱导的IFN―B的表达

五、MITA定位于线粒体

六、MITA与VISA、RIG―I相互作用

七、MITA作为支架蛋白促进TBK1―IRF3的相互作用

八、TBK1介导MITA的磷酸化促进MITA对IRF3的激活

九、小结与讨论

第二节 RNF5对MITA介导***转导的调节

一、研究背景和立项依据概述

二、RNF5是MITA相互作用蛋白

三、过表达RNF5抑制病毒感染引起的IFN―β的激活

四、RNAi下调RNF5的表达促进病毒感染引起的IFN―β的激活

五、RNF5在MITA水平调节细胞抗病毒反应

六、RNF5催化MITA泛素化降解

七、RNF5催化MITA泛素化发生在MITA K150

八、RNF5在线粒体泛素化MITA

九、小结与讨论

第三节 RNF5催化VISA泛素化降解

一、研究背景与立项依据概述

二、病毒感染诱导RNF5与VISA相互作用

三、RNF5诱导VISA通过泛素蛋白酶体途径降解

四、RNF5泛素化VISA发生在K361和K462

五、RNF5对VISA的泛素化***于Itch

六、小结与讨论

第四节 研究总结与展望

参考文献

缩略词表

致谢

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