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本书作为《海洋酶工程》课程的配套实验教材，针对《海洋酶工程》课程中所涉及的相关实验如产酶微生物的筛选、鉴定、酶基因***、异源表达和纯化、酶的固定化、酶分子的改造等实验内容进行顺序编排，选取了各个知识点的经典实验进行编写。书中内容涵盖了海洋酶工程研究整个过程的始终，从海洋微生物的筛选、分离、纯化、鉴定到基因组的提取、目标基因的***、表达、纯化、性质表征和产物分析。此外，还补充了海洋宏基因组文库的构建、野生型酶的纯化以及酶固定化等内容，以及酶工程下游产物的分离纯化及活性评价等内容。

实验室安全须知

实验一 普通光学显微镜的使用

实验二 玻璃器皿的清洗、包扎和干热

实验三 培养基的制备与高压蒸汽

实验四 海洋微生物的接种、分离及无菌操作

实验五 海洋细菌的简单染色技术

实验六 海洋细菌的革兰氏染色技术

实验七 海洋细菌的芽孢染色技术

实验八 海洋细菌的荚膜染色技术

实验九 海洋细菌的鞭毛染色技术

实验十 海洋放线菌的观察

实验十一 海洋酵母菌的观察

实验十二 海洋霉菌的观察

实验十三 海洋细菌的平板菌落计数法

实验十四 海洋细菌生长曲线的测定

实验十五 海洋细菌的生理生化反应

实验十六 海洋细菌的分离及鉴定

实验十七 海洋细菌基因组DNA的提取

实验十八 海洋酵母菌的分离及鉴定

实验十九 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白相对分子质量

实验二十 Folin-酚试剂法(Lowry法)测定蛋白浓度

实验二十一 尺寸排阻色谱分离纯化几丁质酶

实验二十二 果胶酶的包涵体复性

实验二十三 海洋宏基因组文库构建及目标基因筛选

实验二十四 褐藻胶裂解酶编码基因重组质粒的转化

实验二十五 褐藻胶裂解酶重组质粒诱导表达及纯化

实验二十六 褐藻胶裂解酶活性测定及酶动力学参数测定

实验二十七 褐藻胶裂解酶的酶学性质表征

实验二十八 褐藻胶裂解酶产物分析

实验二十九 壳聚糖酶重组质粒转化

实验三十 壳聚糖酶重组质粒诱导表达及纯化

实验三十一 壳聚糖酶活性测定及酶动力学参数测定

实验三十二 壳聚糖酶的酶学性质表征

实验三十三 壳聚糖酶的产物分析

实验三十四 κ-卡拉胶酶重组质粒的转化

实验三十五 κ-卡拉胶酶重组质粒的诱导表达

实验三十六 κ-卡拉胶酶的磁珠纯化

实验三十七 κ-卡拉胶酶的酶学性质表征

实验三十八 κ-卡拉胶酶的降解产物分析

实验三十九 石莼多糖裂解酶重组质粒转化

实验四十 石莼多糖裂解酶重组质粒异源表达及纯化

实验四十一 石莼多糖裂解酶活性测定及酶动力学参数测定

实验四十二 石莼多糖裂解酶酶学性质表征

实验四十三 石莼多糖裂解酶降解产物分析

实验四十四 重组果胶酶的固定化

实验四十五 卡拉胶寡糖的活性评价

附录

附录1 微生物常用培养基配方

附录2 微生物染色常用染液配方

附录3 海洋产酶微生物筛选常用方法

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书籍介绍

本书作为《海洋酶工程》课程的配套实验教材，针对《海洋酶工程》课程中所涉及的相关实验如产酶微生物的筛选、鉴定、酶基因***、异源表达和纯化、酶的固定化、酶分子的改造等实验内容进行顺序编排，选取了各个知识点的经典实验进行编写。书中内容涵盖了海洋酶工程研究整个过程的始终，从海洋微生物的筛选、分离、纯化、鉴定到基因组的提取、目标基因的***、表达、纯化、性质表征和产物分析。此外，还补充了海洋宏基因组文库的构建、野生型酶的纯化以及酶固定化等内容，以及酶工程下游产物的分离纯化及活性评价等内容。